氨苄青霉素单抗鉴定与酶联免疫检测方法的初步研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 陆彦
作者: 陆彦;吴国娟;王金洛;徐福洲
作者机构:
关键词: 氨苄青霉素;单克隆抗体;ELISA
期刊名称: 畜牧与兽医
ISSN: 0529-5130
年卷期: 2005 年 37 卷 10 期
页码: 1-4
收录情况: 北大核心
摘要: 利用碳化二亚胺(EDC)法将氨苄青霉素(AMP)与匙孔嘁血蓝蛋白(m cKLH)偶联制备免疫原免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,建立分泌氨苄青霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞染色体数目为97~104条,3D12株亚型为IgG2 a,用其制备的腹水ELISA效价达到2×106。亲和常数为3×10-10mol/L,抗体相对分子质量为1.54×105,与其他抗生素的交叉反应率小于0.01%。采用间接竞争ELISA方法建立检测AMP的标准曲线,在0.5~100 ng/mL范围内呈线形相关,回归方程为Y=0.056 9X+0.130 8,相关指数R2=0.994 8,以10%抑制率对应的浓度计算,该方法对AMP的检测限为0.3 ng/mL,对市售消毒纯牛奶模拟样品最低检测限为0.4 ng/mL。
分类号: S859.84
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