猪急性腹泻综合征冠状病毒RT-LAMP快速检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韩郁茹

作者： 韩郁茹;石达;张记宇;时洪艳;陈建飞;张鑫;刘建波;冯力

作者机构：

关键词： 猪急性腹泻综合征病毒;N基因;反转录-环介导恒温扩增技术;快速检测

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2021 年 43 卷 001 期

页码： 35-39

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立简捷、灵敏的猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)检测方法,本研究针对SADS-CoV N基因片段保守区域设计特异性的反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)引物,经条件优化后显示建立的SADS-CoV RT-LAMP检测方法最佳反应条件为64℃,50 min,初步建立SADS-CoV的RT-LAMP快速检测方法.利用该方法检测SADS-CoV、猪流行性腹泻性病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪肠道病毒9型(PEV9),评估其特异性,结果显示除SADS-CoV外,该方法与其它病原无交叉反应,特异性较强;将病毒RNA 10倍倍比稀释后作为模板,利用该RT-LAMP与普通RT-PCR同时检测,结果显示,RT-LAMP方法比普通RT-PCR方法的敏感性高103倍,敏感性较高.以同一批次或不同批次的SADS-CoV核酸为模板进行RT-LAMP试验,结果显示RT-LAMP批内批间均可稳定的检出阳性样本,表明该方法具有良好的重复性和稳定性.对经口服感染SADS-CoV和未感染仔猪的临床样本进行检测,结果显示RT-LAMP与普通RT-PCR检测结果高度一致.本实验首次建立的SADS-CoV可视化RT-LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高,操作简便、快速和高通量检测的优点,为临床SADS-CoV感染的快速诊断和综合防控提供检测手段.

分类号： S854.4

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