猪圆环病毒2型衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 姚永红

作者： 姚永红;崔然;赵钦;王刚;肖一红;周恩民

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒2型;ORF2蛋白;单克隆抗体

期刊名称： 山东农业科学

ISSN： 1001-4942

年卷期： 2012 年 44 卷 09 期

页码： 9-12+21

摘要： 为获得猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白单克隆抗体,将516 bp的ORF2基因片段克隆入pET-28a(+),转化入大肠杆菌,在IPTG的诱导下表达,用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定。将纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备单克隆抗体,叠加ELISA方法检测两株单克隆抗体识别的抗原表位关系。SDS-PAGE和Western blot结果表明重组蛋白ORF2得到高效表达;筛选获得两株稳定分泌抗ORF2单克隆抗体的杂交瘤细胞系3H3和3F2,其分泌的单体均为IgG1亚型;且均具有较高的特异性和敏感性;叠加ELISA显示,两株单克隆抗体识别不同的抗原表位。本研究制备的单抗有较好的生物学特性,为PCV2的研究及快速准确诊断方法的建立提供了平台。

分类号： S852.65

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