隐孢子虫鼠基因型CP15基因真核表达质粒的构建及在Hela细胞中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 苏庆美

作者： 苏庆美;何生虎;米荣升;张国恩;黄燕;周鹏;秦培兰;呼高伟;陈兆国

作者机构：

关键词： 隐孢子虫鼠基因型;CP15;真核表达质粒;Hela细胞;表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2011 年 05 期

页码： 519-525

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了构建隐孢子虫鼠基因型CP15基因的重组真核表达质粒,检测其重组质粒在Hela细胞中的表达。采用PCR方法,从pMD18-T-CP15菌液中扩增了CP15及含寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)的CP15基因,酶切测序鉴定;将该基因亚克隆至pVAX1载体中,用脂质体介导的方法转染Hela细胞,RT-PCR法、间接免疫荧光法和Western-blot法检测表达蛋白的生物学活性。结果显示,扩增了约360 bp和380 bp的隐孢子虫鼠基因型CP15和含CpG-ODN的CP15基因,酶切测序鉴定成功构建了pVAX1-CP15和含有CpG-ODN的重组真核表达质粒pVAX1-C-CP15。转染Hela细胞后,用RT-PCR法检测到外源基因有效的转录,用间接免疫荧光、SDS-PAGE和Western-blot法检测到外源基因的有效表达。结果表明,构建的重组真核表达质粒能够在Hela细胞中成功转录和表达,并且表达产物具有良好的免疫活性。这为下一步深入研制具有高保护性的隐孢子虫核酸疫苗奠定了基础。

分类号： S852.7

  • 相关文献

[1]1型和4型马疱疹病毒VHS蛋白在HeLa细胞中的表达与定位. 曲娟娟,胡晓亮,顾海东,张春苗,冉多良. 2016

[2]隐孢子虫鼠基因型卵囊壁蛋白CP41基因的克隆及原核表达. 于慧珠,陈兆国,岳城,米荣升,夏延富. 2009

[3]隐孢子虫鼠基因型卵囊壁蛋白CP41基因的原核表达及抗血清的制备. 于慧珠,岳城,陈兆国,米荣升,夏延富. 2010

[4]隐孢子虫P23基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立. 张国恩,米荣升,苏庆美,黄燕,周鹏,胡义彬,秦培兰,呼高伟,陈兆国. 2011

[5]细胞因子与CpG-ODN对隐孢子虫CP15核酸疫苗的佐剂效应研究. 苏庆美,何生虎,米荣升,周鹏,黄燕,张国恩,秦培兰,呼高伟,陈兆国. 2011

[6]微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP15基因的克隆及核苷酸序列分析. 米荣升,陈兆国,岳城,于慧珠,薛方民,于咏兰,林矫矫. 2007

[7]泰泽隐孢子虫CP15基因的原核表达及抗血清制备. 宋悦,米荣升,赵权,薛方民,苏庆美,黄燕,游艳敏,陆珂,韩先干,陈兆国. 2017

[8]CP15亚单位疫苗对小鼠隐孢子虫感染的免疫保护效果研究. 苏庆美,何生虎,米荣升,黄燕,周鹏,张国恩,秦培兰,呼高伟,陈兆国. 2011

[9]柳珊瑚来源的愈创木薁倍半萜生物碱化合物Muriceidine A体外抗肿瘤活性的研究. 买小圆,刘在亮,唐薇,戚欣,李国强,李静. 2019

[10]菌蜕搭载的埃博霉素促进Caspase-3介导的HeLa细胞凋亡. 祝文兴,秦春晶,刘新利,张玉玉. 2018

[11]脂质体介导pAcGFP-bFADD重组质粒转染Hela细胞条件的优化. 杨润军,李武峰,张路培,许尚忠,李俊雅,高雪,陈金宝. 2009

[12]影响生长抑素重组质粒pEGS/2SS转染HeLa细胞效果的因素研究. 何晓红,曹少先,茆达干,杨利国. 2010

[13]两种提取细胞外泌体方法的比较. 周昌娈,谭磊,谢军,丁铲. 2018

[14]海南16种红树植物的肿瘤细胞毒活性筛选. 戴好富,梅文莉,洪葵,曾艳波,庄令. 2005

[15]蛋白激酶PKR在HeLa细胞中的过表达及其siRNA干扰的鉴定. 吴娜,赵志荀,吴国华,颜新敏,叶奕优. 2016

[16]微小隐孢子虫类钙调蛋白基因真核表达质粒的构建及在Hela细胞中的表达. 杨晓娇,周鹏,米荣升,黄燕,石凯. 2014

[17]口蹄疫病毒多基因重组质粒在BHK-21细胞中的表达. 郭慧琛,刘在新,孙世琪,卢增军,周广清,祁淑云,靳野,刘湘涛,谢庆阁. 2003

[18]IBDV超强毒HZ株VP2基因的克隆和真核表达质粒的构建. 许信刚,李健强,王笑梅,童光志. 2000

[19]口蹄疫病毒多基因重组质粒的体外表达及衣壳组装. 郭慧琛,刘在新,孙世琪,冷青文,刘湘涛,谢庆阁. 2005

[20]IBDV超强毒HZ株VP2基因的克隆和真核表达质粒的构建. 许信刚,李健强,王笑梅,童光志. 2000

作者其他论文 更多>>

微信小程序