共表达PRRSV修饰的GP5与M蛋白的重组改良型痘苗病毒安卡拉株的构建及其生物学特性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郑其升

作者： 郑其升;李鹏;曹瑞兵;候继波;陈溥言

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;改良型痘苗病毒安卡拉株;修饰的GP5与M蛋白;共表达

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2008 年 24 卷 05 期

页码： 65-72

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)修饰的ORF5(MORF5)与ORF6基因分别克隆入笔者构建的改良型痘苗病毒安卡拉株(Modified vaccinia virus ankara,MVA)转移载体pLR-gpt的两个多克隆位点中,构建重组转移载体pLR-MORF5/ORF6。经脂质体介导,将构建好的pLR-MORF5/ORF6转染已感染亲本MVA2h的BHK-21细胞单层,用药物选择性培养基(MXHAT)在24孔板上进行连续筛选纯化,得到带有筛选标记的重组病毒rMVAgpt-MGP5/M。将rMVAgpt-MGP5/M感染表达Cre重组酶的BHK-21细胞(BHK-Cre),获得删除筛选标记的重组病毒rMVA-MGP5/M。PCR证明MORF5与ORF6成功插入MVA基因组中;Western blotting与间接免疫荧光证明重组病毒能表达MGP5与M蛋白;重组病毒的生长特性表明与亲本MVA出现病变的时间及病毒滴度基本一致。结果表明,本研究成功构建了共表达PRRSVMGP5与M蛋白的重组MVA,并且表达产物具有免疫原性;外源基因的插入不影响MVA复制,具较好的稳定性,从而为PRRSV新型基因工程疫苗的研制奠定了良好的基础。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]共表达PRRSVGP5蛋白和CSFVE2蛋白的“自杀性”DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答. 孙建富,赵和平,李娜,孙元,夏照和,周艳君,王煜,祁巧芬,鲁承,仇华吉. 2008

[2]共表达PRRSV GP5蛋白和CSFV E2蛋白的“自杀性”DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答. 孙建富,赵和平,李娜,孙元,夏照和,周艳君,王煜,祁巧芬,鲁承,仇华吉. 2008

[3]共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白和猪瘟病毒E2蛋白的“自杀性”DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答. 孙建富,赵和平,李娜,孙元,夏照和,周艳君,王煜,祁巧芬,鲁承,仇华吉. 2008

[4]共表达PRRSVGP5蛋白和CSFV E2蛋白的“自杀性”DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答. 孙建富,赵和平,李娜,孙元,夏照和,周艳君,王煜,祁巧芬,鲁承,仇华吉. 2008

[5]大肠杆菌中表达关键基因产异丁醇的研究. 郭媛,庞浩,黄日波. 2011

[6]青海湖盐单胞菌Ectoine合成基因簇ectABC的重组共表达. 朱德锐,韩睿,沈国平,龙启福,李丹丹,刘建,刘德立. 2015

[7]黄瓜共表达基因模块的识别及其特点分析. 林行众,张忠华,杨清,黄三文. 2015

[8]猪圆环病毒2型Cap蛋白与猪O型口蹄疫病毒VPl蛋白在杆状病毒中共表达及鉴定. 王一平,郭龙军,唐青海,刘丹,危艳武,李胜斌,刘建波,黄立平,吴洪丽,刘长明. 2013

[9]共表达3种纤维素降解酶的转基因小鼠模型的建立与分析. 何祖勇,刘志国,孙燕霞,丛佩清,陈瑶生. 2016

[10]中国美利奴羊胚胎骨骼肌发育的加权基因共表达网络分析. 石田培,侯浩宾,王欣悦,赵志达,尚明玉,张莉. 2020

[11]一种植物双基因共表达载体的构建及应用. 翟琪麟,安泽伟,李雅超,赵建文,谢黎黎,李维国,黄华孙. 2013

[12]CecropinB与Xa21基因共表达提高转基因水稻白叶枯病抗性. 于彦春,张光恒,郭龙彪,曾大力,赵艳,胡兴明,黄大年,钱前. 2006

[13]利用毕赤酵母系统直接分泌表达具有活性的谷氨酰胺转胺酶. 李鹏飞,孙红兵,游丽金,巩伏雨,陈藻,张爱联,朱泰承. 2013

[14]鸡干扰素α和白介素18在杆状病毒中共表达及其对H9N2禽流感抑制作用. 袁朋,许传田,张秀美,胡北侠,杨少华,张琳,崔言顺. 2014

[15]斯氏艾美耳球虫MIC-5与兔IL-15基因在真核细胞中的共表达. 孟庆玲,乔军,才学鹏,田广孚,闫鸿斌,骆学农. 2011

[16]TGEV与PEDV核衣壳蛋白双价基因原核质粒的构建与表达. 王劭,陈少莺,朱小丽,程晓霞,林锋强,陈仕龙,李兆龙,朱晓琳. 2011

[17]O型FMDVP1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒的构建及其在BHK-21细胞中的表达. 吴国华,张强,颜新敏,侯俊玲,赵志荀,崔力凡,李健,朱海霞,朱彩珠. 2010

[18]过表达TaLEA1和TaLEA2基因提高转基因拟南芥的耐盐性. 姜奇彦,李丽丽,牛风娟,孙现军,胡正,张辉. 2017

[19]猪圆环病毒2型Cap蛋白与猪O型口蹄疫病毒VP1蛋白在杆状病毒中共表达及鉴定. 王一平,郭龙军,唐青海,刘丹,危艳武,李胜斌,刘建波,黄立平,吴洪丽,刘长明. 2013

[20]在毕赤酵母中利用口蹄疫病毒(FMDV)2A实现dTomato和串联MagaininⅡ基因的共表达. 卢艳敏,崔海信,王承民,何宏轩. 2012

作者其他论文 更多>>

微信小程序