烟曲霉β-葡萄糖苷酶的基因克隆、表达及酶学性质分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 谢贻

作者： 欧阳浩淼;黄日波;陈东;金城

作者机构：

关键词： 烟曲霉;β-葡萄糖苷酶;原核表达;酶学性质

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2013 年 29 卷 09 期

页码： 1245-1253

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 探索获得优良的β-葡萄糖苷酶基因,对实现其工业化生产具有重要意义。烟曲霉Aspergillus fumigatus基因组中含有一个bgl基因(1 752 bp),编码的蛋白约65 kDa,推测为属于糖苷水解酶家族的β-葡萄糖苷酶。将bgl基因克隆并构建了重组表达载体pGEX-bgl,转化大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),经IPTG诱导获得表达。重组蛋白经亲和层析纯化后,以七叶苷为底物进行了酶学分析,结果表明该酶的最适温度是45℃,最适pH在5.5~6.0之间,对七叶苷的Km值为17.7 mmol/L。该酶在pH 4~7范围内稳定;70℃保温2 h后仍能保持60%的活性。金属离子和化学试剂对酶活性有不同程度的影响,Ca2+对重组酶有轻微的激活作用,而SDS可强烈抑制其活性。由于其相对于真菌来源的其他葡萄糖苷酶稳定性较高,为进一步的研究与应用奠定了基础。

分类号： Q78

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