猪IGF-Ⅰ mRNA实时荧光定量PCR定量标准的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 肖书奇

作者： 肖书奇;张嘉保;张树敏;赵志辉;刘保国;李爽;戴立胜;赵中利;李毅;高妍

作者机构：

关键词： 猪;胰岛素样生长因子Ⅰ;参考标准

期刊名称： 广西农业生物科学

ISSN： 1008-3464

年卷期： 2006 年 25 卷 S1 期

页码： 10-14

收录情况： CSCD

摘要： 采用RT-PCR的方法利用肝组织提取的总RNA制备猪胰岛素样生长因子Ⅰ(pIGFⅠ-)cDNA目的片断,与pM D-18T vector连接成重组质粒,并转化E scherich ia coli DH 5α。联合应用PCR鉴定、α互补法、限制性酶切和序列分析法鉴定其特异性。测定纯化的重组质粒A260,确定浓度并以此制备实时荧光定量PCR(FQ-PCR)梯度浓度参考标准。结果表明:pIGFⅠ-cDNA目的片断成功制备,并获得稳定的重组质粒,保持了目的片断序列的特异性和完整性,成功构建了pIGFⅠ-实时FQ-PCR的定量参考标准。

分类号： Q522-3

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