鸡传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中的表达及其免疫学原性分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 亓丽红

作者: 亓丽红;艾武;黄兵;刘涛;秦卓明;宋敏训

作者机构:

关键词: 鸡传染性支气管炎病毒;S1基因;毕赤酵母;表达;免疫原性

期刊名称: 浙江农业学报

ISSN: 1004-1524

年卷期: 2010 年 22 卷 05 期

页码: 585-589

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据对山东IBV流行株的遗传变异分析,选取流行代表株LC2,扩增其S1基因,将其S1基因克隆到pPIC9K载体中,构建了真核表达质粒pPIC9K-S1,经SacⅠ线性化后,通过电转化到毕赤酵母GS115中,经MD/MM及G418筛选,PCR鉴定,获得多拷贝阳性重组菌pPIC9K-S1-GS115。将重组菌在0.5%甲醇中进行诱导分泌表达,对表达产物进行SDS-PAGE,Western blot分析。结果显示,在酵母培养基上清中检测到分子量为90 ku为目的蛋白,与鸡IBV阳性血清发生特异性反应。将表达上清及其重组菌菌体饲喂SPF鸡,40 d后采血,可检测到IBV保护性抗体。结果表明:表达的IBV的S1蛋白具有很好的免疫原性,为ELISA诊断试剂盒的研制及IBV疫苗的研制奠定基础。

分类号: S852.5

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