猕猴桃AcSPS1基因克隆及其在番茄中的过表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈成

作者： 陈成;王依;刘凤丽;万春雁;钱亚明;狄华涛;霍恒志;阎永齐

作者机构：

关键词： 猕猴桃;蔗糖磷酸合酶;基因克隆;番茄过表达分析

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2025 年 38 卷 008 期

页码： 1637-1643

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】探究猕猴桃(Actinidia chinensis)蔗糖磷酸合酶(Sucrose phosphate synthase,SPS)的基因特性及其在果实发育过程中的作用，为猕猴桃果实品质改良提供理论基础。【方法】以猕猴桃为试材，采用生物信息学方法鉴定成熟果实高表达AcSPS1基因，对该基因进行克隆、生物信息学分析、亚细胞定位以及遗传转化获得异源过表达番茄株系。【结果】从‘脐红’猕猴桃果实中克隆得到AcSPS1全长序列，该基因序列共3153 bp，编码1050个氨基酸，分子质量为117.98 kD，亲水性系数为-0.424。蛋白二级结构预测分析表明α-螺旋占比41.52%,β-转角占比6.48%，延伸链占比14.19%，无规则蜷曲占比37.81%。氨基酸序列多重比对分析发现猕猴桃AcSPS1与茶CsSPS1氨基酸系列相似度最高，达90.39%。系统进化树分析发现猕猴桃AcSPS1与茶CsSPS1具有密切的进化关系。拟南芥原生质体亚细胞定位分析表明AcSPS1定位在细胞质中。通过构建AcSPS1过表达载体并在Micro-Tom番茄中异源表达，PCR检测及蛋白水平检测得到3个过表达转基因转系。与野生型番茄相比，3个转基因株系果实中AcSPS1基因相对表达量均显著增加。【结论】鉴定并克隆得到猕猴桃果实高表达基因AcSPS1，蛋白定位在细胞质中，并成功获得异源过表达番茄材料，为进一步探究其在猕猴桃果实蔗糖生物合成中的功能提供参考。

分类号： S663.4

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