检测猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘俊平

作者： 刘俊平;庄金山;孙志;张建武;陶琦;袁世山

作者机构： 上海出入境检验检疫局;中国农业科学院上海兽医研究所

关键词： 猪圆环病毒2型;TaqMan荧光PCR;检测

期刊名称： 上海交通大学学报(农业科学版)

ISSN： 1671-9964

年卷期： 2007 年 25 卷 05 期

页码： 67-72

摘要： 针对猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2的序列设计两对特异性引物及TaqMan探针,以感PCV2的PK-15细胞培养上清的DNA提取物为模板,分别扩增499 bp和131 bp的片段,建立了检测PCV2的TaqMan荧光PCR方法。结果表明:TaqMan荧光PCR检测PCV2的最佳探针浓度为0.5 pmol·μL-1;TaqMan荧光PCR两步法操作快捷,扩增131 bp的引物PCF1101/PCR1232检测敏感性高(3.17×102拷贝·μL-1),重复性好。在诸多检测样品中,除检测到PCV2检测指标出现阳性外,猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV),日本乙型脑炎病毒(JEV),猪伪狂犬病毒(PRV),猪瘟病毒(CSFV)及PK-15细胞等检测指标均为阴性,表明特异性强;与普通PCR的检测结果(2/10)比较,本法的敏感性和对临床样品的阳性检出率(3/10)更高。上述研究表明,本方法快速、敏感、特异,具有很高的重复性,且可实时监测,能有效检测PCV2。

分类号： S854.43

  • 相关文献

[1]新型猪细小病毒(PPV4)TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用. 黄律,龙进学,翟少伦,刘长龙,张荣,袁世山. 2010

[2]猪细小病毒4型TaqMan荧光定量PCR方法的建立与应用. 黄律,龙进学,翟少伦,刘长龙,张荣,袁世山. 2011

[3]猪圆环病毒2型和猪生殖与呼吸综合征病毒混合感染的检测. 蔡承如,尚佑军,蔺芳,田宏,尹双辉,吴锦艳,杨顺利,刘湘涛. 2009

[4]猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测方法的建立. 张福良,宋长绪,杨鸣琦,朱道中,蒋智勇,林志雄,刘燕玲,宋志军. 2006

[5]PCR技术在猪圆环病毒2型检测中的应用. 车勇良,王隆柏,魏宏,周伦江,庄向生,陈少莺. 2006

[6]猪圆环病毒2型LAMP可视化快速检测方法的研究. 胡瑞丽,倪建平,赵笑,赵庆,史斌,赵桓震,赵斌安,赵凯. 2016

[7]多重荧光定量PCR检测猪圆环病毒2a、2b和2d基因型方法的建立与应用. 钱雯娴,肖琦,赵霞玲,温立斌,索朗斯珠,何孔旺. 2023

[8]PRV、PCV-2、PPV多重PCR试剂盒的研制. 余波,谭诗文,冉懋韬,杨丽娟,徐景峨,史开志. 2013

[9]猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型和猪黄痢混合感染的诊治实例. 余波,谭诗文,冉懋韬,徐景峨. 2013

[10]猪圆环病毒2型SYBR GreenⅠ荧光定量PCR诊断方法的建立. 余波,周思旋,谭诗文,徐景峨,史开志,杨莉. 2014

[11]猪圆环病毒2型抗体检测间接ELISA方法的建立. 丛丽媛,蒋智勇,张春红,陈德坤,宋长绪. 2008

[12]检测PRV野毒株、PCV-2及PPV多重PCR方法的建立及初步应用. 余波,谭诗文,冉懋韬,徐景峨,艾玉萍,魏赐开,刘兵. 2010

[13]猪圆环病毒2型LAMP诊断方法的建立及初步应用. 余波,冉懋韬,徐景峨,谭诗文. 2014

[14]猪圆环病毒2型感染对猪群生产性能的影响. 李莉娜,毛君婷,姜玲玲,史开志. 2014

[15]利用E.coli表达猪圆环病毒2型Cap蛋白生产病毒样颗粒疫苗. 赵晓云,乔绪稳,陈瑾,李鹏成,于晓明,朱国强,郑其升,侯继波. 2015

[16]猪圆环病毒2型Cap基因的克隆与原核表达. 杨克礼,时代,段正赢,田永祥,周丹娜,郭锐,刘泽文,袁芳艳,刘威,孟丽. 2017

[17]类猪圆环病毒2型因子P1和P2诱导PK-15细胞凋亡的研究. 温立斌,何孔旺,杨汉春,王玉然,李广东,惠孝鑫. 2008

[18]TUNEL法检测类猪圆环病毒2型因子P1诱导猪免疫器官细胞凋亡的研究. 温立斌,何孔旺,杨汉春,王玉然,董美响. 2008

[19]猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗(LG株)在规模猪场的应用效果观察. 夏伟,罗玉均,张宇辉,唐志芬,付朝阳. 2011

[20]猪圆环病毒2型分子生物学研究进展. 李富强,王利丽,李秀丽. 2015

作者其他论文 更多>>

微信小程序