基于调控DNA序列变化的MphR(A)蛋白类ELISA系统性能提升研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 程永友

作者： 程永友;陈海江;费强;杨曙明;刘晓夏

作者机构：

关键词： 大环内酯类抗生素;类ELISA系统;MphR（A）蛋白

期刊名称： 食品安全质量检测学报

ISSN： 2095-0381

年卷期： 2021 年 024 期

页码： 9445-9451

收录情况： 北大核心

摘要： 目的考察DNA序列对利用MphR（A）蛋白和启动子mph（A）序列的结合-解离特性构建的大环内酯类抗生素的体外类酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测系统性能的影响。方法通过MphR（A）蛋白与3段野生型DNA序列及其他突变序列构建类ELISA检测系统,先通过添加和不添加红霉素作用,获得各DNA所得的最大和最小OD450,以最大与最小OD450值相差较大、最小OD450值接近0作为表现较好的标准,再对表现较好的系统计算红霉素反应的半数抑制浓度（median inhibitory concentration,IC50）值。结果 Mph R（A）蛋白可以和不同DNA序列结合,从而获得不同的检测性能。采用突变序列AC4-DNA建立的类ELISA系统IC50值为（2.33±0.70） ng/m L,低于野生型DNA所得的IC50 [（3.95±1.18） ng/m L],系统灵敏度提升。结论通过DNA调控该类ELISA系统是一种可行的手段。此外,在野生型A-DNA、B-DNA、C-DNA均发现一段22bp伪回文结构,该伪回文结构符合Tet蛋白家族的DNA序列特征,认为是该伪回文结构是与蛋白结合的核心序列。

分类号： TS207.3

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