鸭新城疫病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的初步建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙敏华

作者： 孙敏华;董嘉文;吕殿红;周秀蓉;李林林;胡奇林

作者机构：

关键词： 鸭新城疫毒;单克隆抗体;夹心ELISA

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2012 年 33 卷 12 期

页码： 60-64

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了对目前流行的鸭新城疫进行快速诊断,应用蔗糖密度梯度离心纯化后的鸭新城疫病毒免疫6周龄雌性Balb/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合。采用ELISA方法筛选阳性细胞克隆,经3次亚克隆后获得一株能稳定分泌鸭新城疫病毒特异性单克隆抗体的细胞株2C1。以PEG纯化后的2C1腹水为捕获抗体,辛酸-硫酸铵纯化的兔抗鸭新城疫病毒多克隆抗体为第二抗体,HRP标记的羊抗兔抗体作为酶标抗体,建立了检测鸭新城疫病毒抗原的双抗体夹心ELISA方法。结果表明,当2C1包被量为4μg/孔,鸭新城疫病毒1∶10稀释,兔抗鸭新城疫病毒多抗作用量为0.1μg/孔,HRP标记的羊抗兔二抗1∶10 000倍稀释,每次作用时间为1h时,P/N比值最高,且阳性OD值最接近1.0。试验表明,该方法特异性好,不与IBV、ARV、GPV、DPV、DHV尿囊液及H5、H9标准阳性抗原发生反应;可以检测出0.2μg纯化病毒,比传统的HA试验的敏感性至少高64倍;批间和批内变异系数均小于10%。本研究建立的双抗体夹心ELISA方法为鸭新城疫病毒的快速诊断奠定了基础。

分类号： S855.3

  • 相关文献

[1]CP4-EPSPS夹心ELISA配对单克隆抗体的研制和生物学特性分析. 李忠鹏,于寒松,胡耀辉,时圣凤,刘蕴慧,段永杰,李小宇,王永志,李启云. 2013

[2]犬瘟热病毒单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立. 孙婧,毕振威,夏兴霞,王晓丽,诸玉梅,董晨红,贾红,朱瑞良,王永山. 2013

[3]犬瘟热病毒单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立. 毕振威,夏兴霞,王晓丽,诸玉梅,董晨红,贾红,朱瑞良,王永山. 2013

[4]副猪嗜血杆菌病原夹心ELISA检测方法的建立及应用. 宋帅,李春玲,臧莹安,郭海祥,李淼,杨冬霞,徐志宏. 2016

[5]双抗体夹心ELISA检测ASFV抗原方法的建立与评价. 李其炫,岳慧贤,蒋依倩,张艳艳,陈腾,王述超,张守峰,扈荣良. 2024

[6]检测马白细胞介素-18双抗体夹心ELISA方法的建立. 童铁钢,白宇,张维军,王群,刘光亮,徐树兰,吴东来. 2009

[7]猪繁殖与呼吸综合征病毒S1株单抗AG1的生物学特性及夹心ELISA诊断方法的建立. 祁贤,张婉华,叶向阳,朱永军. 2002

[8]羊痘病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立. 吴国华,张强,颜新敏,李健,朱海霞,邵长春,邬向东. 2008

[9]夹心ELISA定量检测猪圆环病毒2b型抗原方法的建立. 杨利,张浩明,陈瑾,乔绪稳,侯继波,郑其升. 2017

[10]初乳与免疫乳中乳铁蛋白含量的比较研究. 程金波,王加启,刘光磊,张春刚,董晓丽,卜登攀,刘开朗. 2008

[11]RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒. 李军,林继煌,陆承平,何孔旺,倪艳秀,还红华,钱永清. 2001

[12]猪FcγRⅢ双抗体夹心ELISA方法的建立及其在PRRSV感染猪中的初步应用. 谷伟红,郭龙军,牛军伟,田志军,冯力,王玉娥. 2016

[13]传染性法氏囊病病毒VP2单克隆抗体夹心ELISA检测试剂盒的研制. 刘静静,王永山,欧阳伟,夏兴霞,潘群兴,王晓丽,毕振威,诸玉梅,朱瑞良. 2014

[14]马γ-干扰素双抗体夹心ELISA检测方法的建立. 白宇,童铁钢,张维军,徐树兰,王群,刘光亮,吴东来. 2008

[15]猪肺炎支原体抗原定量ELISA检测方法的建立. 田瑞雨,熊祺琰,刘茂军,韦艳娜,武昱孜. 2017

[16]绵羊肺炎支原体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用. 王晓楠,张纹纹,陈思宇,单依依,陈益,李文良,程子龙,杨蕾蕾,王金泉,刘茂军. 2024

[17]猪IgA双抗夹心ELISA检测方法的建立及应用. 张亚,冯志新,姚景霆,华利忠,甘源,刘占军,韦艳娜,邵国青. 2013

[18]莱克多巴胺单克隆抗体的研制及阻断ELISA检测方法的建立. 张海棠,王自良,邓瑞广,钟华,范国英. 2008

[19]贫血患者血清转铁蛋白受体测定的临床意义. 乔宏,吴春梅,管洪在,王文正. 2000

[20]满江红鱼腥藻单克隆抗体的制备和应用研究. 刘中柱,程由铨,唐龙飞,郑琦,宋铁英,陈明昂,李怡英,林天龙. 1989

作者其他论文 更多>>

微信小程序