文献类型: 中文期刊
第一作者: 姜锋
作者: 姜锋;许硕;胡正;姜奇彦;张辉
作者机构:
关键词: miRNA;低表达;植物;新方法
期刊名称: 生物技术通报
ISSN: 1002-5464
年卷期: 2014 年 0 卷 09 期
页码: 65-71
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: MicroRNA(miRNA)是一种内源性的21到24个核苷酸长度的小分子RNA,在植物发育过程中起重要作用。旨在建立一种新的植物miRNA下调表达系统,为miRNA的功能研究提供有力的工具。不同于原有target mimicry的构建方法,以miRNA核心序列为基础,通过设计特定DNA引物,利用聚合酶链式反应(PCR)获得多拷贝的靶基因类似序列(Target mimicry or target mimics),构建target mimicry载体,转化拟南芥。通过qRT-PCR验证miRNA靶基因在转基因植株中的表达。以拟南芥6个保守miRNA为基础,获得了各个miRNA下调表达转基因株系,在转基因植株中检测miRNA靶基因的表达,与野生型相比差异明显,均发生了明显的上调。我们基于一种新的target mimicry的载体构建方法,成功建立了一种在植物中具有普遍适用性的高效miRNA低表达系统。
分类号: Q943.2
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