采用噬菌体展示技术筛选玉米赤霉醇的单链抗体

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张晴晴

作者: 张晴晴;张晓;程罗根;刘媛;唐敏;刘贤进

作者机构: 南京师范大学生命科学学院;江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所;盐城工学院化学与生物工程学院

关键词: 噬菌体抗体库;单链抗体;玉米赤霉醇

期刊名称: 免疫学杂志

ISSN: 1000-8861

年卷期: 2009 年 06 期

页码: 108-111

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 目的从噬菌体单链抗体库中筛选玉米赤霉醇(ZER)的阳性克隆。方法人工抗原ZER-BSA作为包被原,采用负筛选,经过连续3轮固相"亲和-洗脱-富集"筛选,富集了噬菌体抗体库中阳性克隆的比例,同时采用Trypsin和ZER竞争洗脱2种洗脱方法。ELISA鉴定阳性克隆,运用SDS-PAGE方法对大肠杆菌分泌蛋白进行了时间条件的摸索。结果随着淘洗轮数的增加,特异性噬菌体抗体得到了高度富集,从6个96孔板的克隆中筛选到10株阳性克隆(阳性大于阴性3倍视为阳性克隆),将菌株转换成功的5株测序发现有4株不同的阳性克隆,对一株进行了原核系统的表达,SDS-PAGE确定了目的条带的存在,相对分子质量为Mr28000。结论为在天然噬菌体抗体库中制备玉米赤霉醇的抗体奠定了基础。

分类号: S816

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