斑马鱼脊椎成骨细胞系的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 闫婷
作者: 闫婷;刘天奇;佟广香;徐欢;张婷婷;匡友谊
作者机构:
关键词: 斑马鱼;成骨细胞;细胞系
期刊名称: 水产学杂志
ISSN: 1005-3832
年卷期: 2024 年 37 卷 006 期
页码: 45-52
摘要: 为建立斑马鱼(Danio rerio)成骨细胞系,将4月龄斑马鱼脊椎剪成2~3 mm3的组织块,置于含有鲤(Cyprinus carpio)血清、表皮细胞生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、L-谷氨酰胺及胎牛血清的M-199培养基中,28℃下用组织块贴壁培养法进行原代成骨细胞培养,用染色体核型鉴定、胞外基质蛋白检测、基因表达及流式RNA原位杂交(RNA-FISH)分析鉴定成骨细胞系。结果显示:已成功构建斑马鱼脊椎成骨细胞系,并传代至40代,生长迅速稳定,复苏状态良好。细胞系中期分裂相的染色体数目2n=50,核型公式(2n=10m+30sm+10st,NF=90),与斑马鱼染色体核型一致。斑马鱼成骨细胞碱性磷酸酶、茜素红矿化结节染色及von Kossa氏矿化结节法染色均呈阳性。鱼骨钙素含量为47 619 ng/L。细胞系中成骨细胞发育标志基因runx2a、bglapl和alp的表达量显著高于斑马鱼肌肉组织。流式RNA-FISH检测结果表明,98%以上的成骨细胞均表达sp7。结论:本研究成功建立了斑马鱼脊椎成骨细胞系,可为骨骼发育及骨相关疾病的机制研究提供体外研究的实验材料。
分类号: S917.4
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