鸡肠炎沙门氏菌转座突变体库的构建及减毒菌株的筛选

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吕爽

作者： 吕爽;朱婷;王秀梅;刘慧芳;司微;于申业;陈利苹;刘思国

作者机构：

关键词： 肠炎沙门氏菌;转座子;突变体库;减毒菌株

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2013 年 35 卷 03 期

页码： 210-213

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为筛选减毒肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)菌株,本研究以含有Mini-Tn5转座子的重组自杀质粒pUT对S.enteritidis SM6株进行转座诱变,利用双亲本滤膜杂交方法与供体菌E.coliβ2155进行接合转移,构建并优化接合转移体系,利用卡那抗性和DAP营养缺陷培养平板筛选法构建了SM6的随机转座突变体库。其中包含5个子库,共计获得364株突变体,经PCR鉴定表明转座子均插入SM6株的基因组中。通过Caco-2细胞侵袭试验筛选S.enteritidis侵袭力减弱并在细胞内增殖受到抑制的减毒突变株,经初筛及验证最终获得3株稳定减毒菌株,为进一步研究减毒菌株突变毒力基因的定位及SM6株的侵袭及感染机制奠定了基础。

分类号： S852.61

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