胎牛小肠上皮干细胞的分离和培养并诱导其向肝细胞样细胞分化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙婷婷

作者： 孙婷婷;蔡连顺;关伟军

作者机构：

关键词： 胎牛;小肠上皮干细胞;分离培养;鉴定;诱导分化

期刊名称： 细胞与分子免疫学杂志

ISSN： 1007-8738

年卷期： 2015 年 31 卷 01 期

页码： 54-57+61

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的建立胎牛小肠上皮干细胞(IESC)分离和培养的体系,并检测其表面标志物及向肝细胞样细胞分化的潜能。方法取3~5月龄胎牛,分离小肠组织,用胶原酶消化获得IESC,在DMEM/F12培养基中培养,观察其形态学特征。传代培养、生长曲线分析其增殖能力,并探索体外分化潜能。反转录PCR检测IESC标志基因Bmi1、Hes1、Lgr5和细胞角蛋白19(CK19)的mRNA表达,免疫细胞化学染色检测CK19、Bmi1、LGR5蛋白的表达。经成纤维细胞生长因子4(FGF-4)和肝细胞生长因子(HGF)诱导后,通过糖原染色和反转录PCR法观察向肝细胞样细胞的分化情况。结果 IESC可在体外扩增培养,表达CK19、Bmi1、Hes1、Lgr5的mRNA和CK19、Bmi1、LGR5蛋白,诱导后细胞糖原染色阳性,表达甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)的mRNA。结论成功建立了IESC的分离培养方法,并成功诱导IESC向肝细胞样细胞分化。

分类号： S823

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