丝状支原体丝状亚种SC型LppB基因的克隆与表达纯化

文献类型: 中文期刊

第一作者: 李媛

作者: 李媛;辛九庆;高玉龙;王砚范

作者机构:

关键词: 丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC);LppB基因;克隆;表达

期刊名称: 中国生物制品学杂志

ISSN: 1004-5503

年卷期: 2006 年 19 卷 04 期

页码: 373-375

收录情况: CSCD

摘要: 目的克隆丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)LppB蛋白基因,并进行表达及纯化。方法通过PCR,扩增MmmSC标准株PG1的LppB全基因,克隆至pMD18-T载体上,并测序鉴定。同时选LppB基因中两个TGA之间903bp片段,与pET30a载体构建重组质粒,进行诱导表达,表达产物经Ni-NTA-His系统纯化。结果PCR扩增的LppB基因长度片段约1869bp,与预期大小相符。将其与NCBI上发布的Afade株、LC型代表株Y-goat和同属的Bovine7株的LppB基因序列相比较,同源性分别为99·8%、92·8%和76·7%,氨基酸同源性分别为99·2%、90·2%和67·0%。经Ni-NTA-His系统纯化,得到纯净的单一蛋白。结论已成功克隆了PG1的LppB蛋白基因,并进行了表达及纯化。

分类号: S852.62

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