A型塞内卡病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭金硕

作者： 郭金硕;侯磊;全荣;王菁;韦莉;刘爵

作者机构：

关键词： A型塞内卡病毒;VP1蛋白;杂交瘤细胞;单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医杂志

ISSN： 0529-6005

年卷期： 2022 年 58 卷 003 期

页码： 20-24

收录情况： 北大核心

摘要： 为制备抗A型塞内卡病毒(SVA)VP1蛋白的单克隆抗体,并初步应用于A型塞内卡病毒的检测,本研究构建了SVA VP1原核重组表达质粒pET30a-GST-VP1(528 bp).将重组质粒转化大肠埃希菌BL21感受态细胞并大量表达VP1重组蛋白,利用纯化的VP1重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0细胞)进行融合,经过细胞亚克隆筛选,获得杂交瘤细胞.将其选为腹水生产细胞株,最后纯化单克隆抗体,通过Western blotting和间接免疫荧光试验对其进行鉴定.结果显示,本研究获得1株能够稳定分泌抗VP1重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,其亚型重链为IgG2a、轻链为Kappa链;Western blotting和间接免疫荧光检测显示,该单克隆抗体能够特异性识别SVA病毒粒子.本研究成功制备的抗SVA VP1蛋白单克隆抗体可为进一步研究A型塞内卡病毒VP1蛋白的生物学功能及A型塞内卡病毒致病机制提供有效途径.

分类号： S855.3

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