本地毛形线虫49 Ku ES蛋白结构基因的分子克隆及原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郑宝亮

作者： 郑宝亮;王秀荣;路义鑫;李冬梅;闫清波;宋铭忻

作者机构：

关键词： 旋毛虫nativa种;旋毛虫spiralis种;49 Ku ES蛋白;基因序列;Western blot分析

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2007 年 29 卷 07 期

页码： 510-514

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 提取Trichinella nativa(T.nativa)肌幼虫的总RNA,用RT-PCR方法扩增出了编码T.nativa 49 Ku ES蛋白的结构基因。基因克隆后测序,序列测定结果表明:目的基因TNPG长度为951 bp,核苷酸序列同已发表的Trichinella spiralis(T.spiralis)相应的序列P49同源性为97.68%,所推导的氨基酸序列同源性为95.24%。将目的基因TNPG插入到原核表达载体pET-30a的BamHⅠ酶切位点处,并转化到感受态表达菌中进行诱导表达。结果显示TNPG在原核表达菌BL-21中获得了高效表达,表达产物为40.8 Ku的融合蛋白,表达量达到菌体总蛋白的22.8%。通过Western blot分析,表达产物可以被小鼠T.nativa和T.spiralis阳性血清以及它们的中国地理株的小鼠血清特异性识别。

分类号： S852.7

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