细粒棘球蚴GST-mu2基因的克隆、表达及重组蛋白反应原性研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈英

作者： 陈英;乔军;孟庆玲;钟文强;刘田莉;贡莎莎;才学鹏

作者机构：

关键词： 细粒棘球蚴;GST-mu2基因;克隆;表达;反应原性

期刊名称： 家畜生态学报

ISSN： 1673-1182

年卷期： 2018 年 01 期

页码： 19-24

收录情况： 北大核心

摘要： 为了研究细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)谷胱甘肽S-转移酶mu 2(GST-mu 2)蛋白的反应原性,根据GenBank中Eg GST-mu2基因cDNA序列设计特异性引物,以Eg头节总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,将PCR产物克隆到pMD19-T载体,测序验证后,将GST-mu2基因亚克隆至表达载体pET-28a中,构建pET-GST-mu2原核表达载体,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达,并对表达蛋白进行反应原性分析。结果表明,GST-mu2cDNA全长660个核苷酸,编码219个氨基酸,该多肽含有2个N端酰基化位点,2个PKC磷酸化位点,3个CKⅡ磷酸化位点,1个TYR磷酸化位点,抗原表位区集中在28~70、147~219位;SDS-PAGE可以检测到32kDa的蛋白特异性条带;Western blot分析显示,表达的pET-GST-mu2重组蛋白能与Eg阳性血清发生特异性反应,具有较强的反应原性,为进一步利用GST-mu2蛋白作为Eg感染诊断的候选抗原奠定了基础。

分类号： S852.7

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