双抗体夹心酶联免疫吸附法检测鱼糜制品中鸡蛋卵白蛋白

文献类型： 中文期刊

第一作者： 朱文嘉

作者： 朱文嘉;陈江平;秦智慧;朱文烨;王联珠;李振兴

作者机构：

关键词： 鸡蛋;卵白蛋白;双抗体夹心酶联免疫吸附法;鱼糜制品

期刊名称： 食品安全质量检测学报

ISSN： 2095-0381

年卷期： 2023 年 006 期

页码： 190-197

收录情况： 北大核心

摘要： 目的 建立双抗体夹心酶联免疫吸附（sandwich enzyme linked immunosorbent assay, sELISA）法检测鸡蛋卵白蛋白（ovalbumin, OVA）的方法,组装定量检测鱼糜制品中OVA含量的ELISA检测试剂盒。方法 确定各步骤反应时间,使用棋盘法确定捕获抗体和检测抗体的最佳工作浓度,建立检测方法并对其性能进行评价。结果 反应最佳条件为:抗原孵育20 min,检测抗体孵育20min,酶促反应显色10 min。兔抗OVA抗体为捕获抗体,工作质量浓度为1μg/mL,辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase, HRP）标记兔抗OVA抗体为检测抗体, 1:5000 （V:V）稀释。采用四参数逻辑曲线拟合标准曲线,所建立sELISA方法的检测范围为8.5～200.0 ng/mL,检出限为3.5 ng/mL,定量限为8.5 ng/mL。批次内和批次间的变异系数分别为2.31%～4.58%和6.06%～12.23%;鱼糜基质中的回收率为80%～130%;测得28种常见食物样品中4种样品的交叉反应率小于0.002%;试剂盒在4℃保存6个月期间,标准品检测结果的变异系数为4.29%～18.91%。结论 建立的方法快速、灵敏、准确、稳定性好,可用于鱼糜制品中鸡蛋OVA的定量检测。

分类号： TS254.7

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