猪链球菌2型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)重组蛋白的酶活性和免疫原性检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张雪寒

作者： 张雪寒;何孔旺;周俊明;倪艳秀;俞正玉;吕立新

作者机构：

关键词： 猪链球菌;次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH);克隆;酶活性

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2009 年 17 卷 06 期

页码： 5-9

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过PCR方法从猪链球菌2型(Streptococcus suis)05ZYH33分离株基因组中扩增出次黄嘌呤核苷酸脱氢酶基因(in-osine5-monophosphate dehydrogenase,impdh),长度1064bp。PCR产物和pET28a载体分别经过EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,连接,成功地构建了重组表达质粒pET28a-impdh,并转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,经过1mmol/LIPTG诱导获得表达,蛋白大小35kD。表达蛋白具有良好的抗原性和酶活性。蛋白经过亲和层析纯化后,在37℃,pH7.0~9.0表现出较强酶活性,NADHA340介于0.662~0.816之间。

分类号： S852.611

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