麦类作物原位杂交影响因素的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张德玉

作者： 张德玉;钟少斌;李浩兵;姚景侠

作者机构：

关键词： 生物素;麦类作物;外源染色体;原位杂交

期刊名称： 植物学报

ISSN： 0577-7496

年卷期： 1995 年 03 期

页码： 181-185+253

收录情况： SCI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了更好地利用原位杂交技术进行麦类作物外源染色体的检测和基因定位，对麦类作物原位杂交的影响因素进行了研究。（１）利用缺口转译法对克隆的ＤＮＡ 片段进行生物素标记，即节省时间，又可以获得较高的标记效率；对麦类作物的基因组ＤＮＡ，宜采用随机寡核苷酸引物标记法进行生物素标记，适当延长标记时间可以提高标记效率。（２）共变性法比较适宜麦类作物的原位杂交，分别变性法如掌握不当易使染色体产生膨胀现象，变性温度过高也会使黑麦（Ｓｅｃａｌｅ ｃｅｒｅａｌ）染色体的轮廓模糊不清。（３）应根据麦类作物亲本之间的亲缘关系决定封阻ＤＮＡ 的使用浓度，并利用生物素标记的簇毛麦（Ｈａｙｎａｌｄｉａ ｖｉｌｌｏｓａ）基因组ＤＮＡ 为探针，从普通小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ ）－簇毛麦双二倍体的染色体中识别了簇毛麦的染色体。（４）麦类作物的原位杂交受洗脱强度的影响很大，利用甲酰胺进行洗脱可以获得背景清晰的原位杂交带型。随着原位杂交技术分辨率的不断提高，该技术还将用于单拷贝基因的染色体定位

分类号： Q943

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