红豆草ISSR体系优化及其在航天诱变种质鉴定中的应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 沈紫微

作者: 沈紫微;陈本建;康俊梅;魏小兰;张蕴薇

作者机构:

关键词: 红豆草;ISSR标记;体系优化;引物筛选;航天诱变

期刊名称: 草业科学

ISSN: 1001-0629

年卷期: 2010 年 27 卷 12 期

页码: 69-76

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用正交设计法优化适合于红豆草(Onobrychis viciaefolia)的ISSR体系,对影响ISSR-PCR的多个因素,包括dNTP、引物浓度、Taq酶浓度、Mg2+浓度进行了4因素3水平的比较、优化,建立了红豆草的IS-SR最佳反应体系。运用该体系进行引物及最佳退火温度的筛选,并应用ISSR分子标记技术初步分析红豆草航天搭载诱变效应。结果表明,红豆草ISSR-PCR最佳反应体系为:2.5μL 10×PCR buffer、50 ng模板DNA、dNTP 0.2 mmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U、引物0.4μmol/L、Mg2+2.0 mmol/L,总体积为25μL。试验从53个ISSR引物中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的12个引物,并依次筛选出各引物的退火温度。12个引物标记结果显示共获得多态性位点142个,多态性比率为73.6%。地面对照的多态位点比率(P)、Nei基因多样度(h)和Shannon多样性指数(I)均低于航天诱变种,太空环境能够诱导红豆草发生基因变异。航天诱变可作为红豆草种质资源创新和品种选育的方法之一。

分类号: S541.403

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