苦瓜Bryodin Ⅱ-like RIP生物信息学分析及原核表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王煜琪

作者： 王煜琪;姚春鹏;张晓爱

作者机构：

关键词： 苦瓜;核糖体失活蛋白;生物信息学分析;原核表达载体

期刊名称： 黑龙江科学

ISSN： 1674-8646

年卷期： 2025 年 16 卷 018 期

页码： 10-14

摘要： 为构建苦瓜BryodinⅡ-likeRIP原核表达载体并进行生物信息学分析，通过CugenDB数据库的苦瓜(OHB3-1)v2基因组获得目的基因CDS序列，结合NCBI数据库的氨基酸序列，利用生物信息学软件预测其结构与功能。以苦瓜全基因组cDNA为模板，PCR扩增目的基因后，通过SacⅠ和SalⅠ双酶切，经T4连接酶连接后转入大肠杆菌DH5α感受态。结果显示，保守结构域分析可知该蛋白属于Ⅰ型核糖体失活蛋白，与α-苦瓜素、β-苦瓜素、MAP30和苦瓜凝集素等典型苦瓜RIPs的核苷酸序列同源性为48.6%～58.5%(氨基酸序列同源性为30.8%～45.5%),成功扩增出与预期大小相符的目的基因，重组质粒经菌落PCR及测序验证苦瓜BryodinⅡ-likeRIP与原核表达载体pET-28a(+)正确连接，生物信息学分析该蛋白具备RIP典型功能域，属于RIP家族，并成功构建苦瓜BryodinⅡ-likeRIP原核表达载体。

分类号： S642.5%Q943.2

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