传染性法氏囊病病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王晓丽

作者： 王晓丽;钱晶;马孙婷;王晶宇;夏兴霞;诸玉梅;郑素雅;王永山;欧阳伟

作者机构：

关键词： 传染性法氏囊病病毒;抗体;间接ELISA

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2020 年 02 期

页码： 159-167

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体间接ELISA检测方法,本研究首先将VP2基因分3段(部分序列重叠),分别为VP2(1～600)、VP2(376～975)和VP2(751～1350),并根据大肠杆菌对密码子的偏爱性进行优化,将优化的3个VP2基因片段分别克隆于原核表达载体pET28a(+)中,转化E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western-blot,结果 3个重组VP2蛋白均获得了表达。用纯化的3个重组VP2蛋白rVP2(1～600)、rVP2(376～975)和rVP2(751～1350)分别作为包被抗原,建立了IBDV抗体间接ELISA(rVP2-ELISA)。用rVP2-ELISA、IDEXX-ELISA(IBDV)及中和试验对96份临床血清样本进行检测,结果显示,3个重组VP2蛋白建立的IBDV抗体间接ELISA检测方法、IDEXX-ELISA(IBDV)与中和试验比较,相对敏感性分别为97.1%、61.8%、58.8%和100%;相对特异性分别为85.5%、82.3%、83.9%和25.8%;符合率分别为89.6%、75.0%、75.0%和52.08%。本研究为研制IBDV抗体间接ELISA检测试剂盒(以重组VP2蛋白作为包被抗原)奠定了基础。

分类号： S852.65

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