利迪链霉菌A02细菌人工染色倒基因组文库的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 董丹

作者： 董丹;吴慧玲;张涛涛;刘伟成

作者机构：

关键词： 利迪链霉菌;BAC文库;脉冲场凝胶电泳

期刊名称： 科技导报

ISSN： 1000-7857

年卷期： 2013 年 31 卷 025 期

页码： 53-57

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利迪链霉菌A02是从京郊森林土壤中分离筛选出的植物真菌病害高效生防菌,其活性产物为安全高效广谱的抗真菌剂纳他霉素.为了克隆纳他霉素生物合成基因簇和调控其表达相关的功能基因.通过基因改良的方式进行A02的定向分子改造,提高纳他霉素的效价和产量.提取了利迪链霉菌A02的基因组DNA,用HindⅢ和BamHI部分酶解后,回收了97-194kb和48.5-97kb大小的高分子量DNA.与质粒载体Copycontrol pCClBAC连接,分别构建了含有800个和1500个克隆的两个BAC文库.从文库中随机挑选20个克隆.酶切检测平均插入片段分别为133kb和65kb,空载率小于1%,假定利迪链霉菌的基因组有8*10^6kb,计算文库基因组覆盖率分别为12.28倍和11.25倍.因此.从文库筛选到目标片段的概率达99.99%以上.

分类号： Q785

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