植物叶片基因组DNA快速提取方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 迟婧

作者： 耿丽丽;高继国;束长龙;张杰

作者机构：

关键词： 基因组DNA;快速提取;细胞破碎法;PCR;扩增

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2014 年 0 卷 09 期

页码： 51-57

收录情况： CSCD

摘要： 为了满足分子生物学研究中大量植株基因需要PCR检测的需求,建立了一种无需研磨、无需有机试剂抽提的快速提取植物叶片基因组DNA的方法。通过比较基因组DNA的浓度及PCR检测结果,获得了最佳提取条件,即约50 mg叶片加入150μL含1%β-巯基乙醇的TE提取液,快速破碎1 min。破碎后的样品4℃13 500×g离心1 min,上清于-20℃冷冻后室温融解,4℃、13 500×g离心1 min,离心后收集的上清溶液即可用于PCR检测。整个提取过程仅需10-12 min,具有样品用量小、操作简单、廉价、高效等优点。使用此方法提取的烟草、水稻、大豆、玉米、油菜和花生的基因组DNA均可用于PCR扩增,并可成功扩增长度为3 244 bp的基因片段。此方法提取的基因组DNA也可用于对未知基因的扩增,获得4条新的花生actin基因序列。

分类号： Q943.2

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