GⅡ型诺如病毒VP2蛋白在昆虫细胞中的表达与定位研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 姚琳

作者： 姚琳;寇晓霞;江艳华;王联珠;吴清平;翟毓秀

作者机构：

关键词： 诺如病毒;VP2蛋白;昆虫细胞;表达;亚细胞定位

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2012 年 39 卷 03 期

页码： 378-385

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】利用杆状病毒表达系统表达诺如病毒(GenegroupⅡ)VP2蛋白,分析其亚细胞定位,为深入研究VP2蛋白的功能奠定基础。【方法】设计可扩增完整ORF3基因片段的引物P1和P2,在下游引物中引入6×His标签的编码序列,从质粒pMD-ORF3中克隆了含有6×His编码序列的ORF3基因,与pFastBac1载体连接,构建重组质粒pFB-ORF3,转化DH10Bac感受态细胞获得重组杆状病毒基因组Bac-ORF3,脂质体介导转染sf9昆虫细胞获得表达VP2蛋白的重组杆状病毒Ac-VP2,感染sf9细胞后,收集病变细胞,采用抗6×His标签的单克隆抗体作为一抗进行Western blot与间接免疫荧光实验鉴定。【结果】Western blot实验证实Ac-VP2感染的sf9细胞在约29 kD处出现特异性条带;间接免疫荧光实验证实Ac-VP2感染的sf9细胞出现特异性绿色荧光,并且VP2主要定位于sf9的细胞核与细胞膜。【结论】诺如病毒VP2蛋白在Ac-VP2感染的sf9细胞中获得成功表达,并且主要定位于sf9细胞的细胞核与细胞膜。

分类号： Q939.4

  • 相关文献

[1]GII型诺如病毒VP2蛋白在昆虫细胞中的表达与定位研究. 姚琳,寇晓霞,江艳华,王联珠,吴清平,翟毓秀. 2012

[2]长牡蛎类HBGAs的提取与组织分布以及温度和盐度对其表达的影响. 刘慧,马丽萍,赵峰,牟伟丽,李国栋,周德庆. 2019

[3]‘藤稔’葡萄VvGAI基因的克隆、亚细胞定位及时空表达分析. 杨光,曹雪,房经贵,宋长年,王晨. 2011

[4]5个大豆AT-hook基因GmAHLs的克隆与定位分析. 张大勇,戚维聪,万群,刘佳,徐照龙,黄益洪,邵宏波. 2017

[5]甘蔗己糖转运蛋白基因ShHXT6的亚细胞定位及表达. 马晓雯,赵婷婷,王俊刚,张树珍,杨本鹏. 2016

[6]扁桃AcCBF1转录因子的克隆及表达分析. 张亮,李疆,帕提曼·阿布都热合曼,罗淑萍,田嘉. 2015

[7]玉米热激转录因子基因ZmHsf25的克隆、特性与耐热性功能分析. 赵立娜,段硕楠,张华宁,郭秀林,李国良. 2017

[8]山羊干扰素刺激基因15克隆、生物信息学分析及亚细胞定位. 唐井玉,杜汉宇,孟春春,刘光清. 2022

[9]利用杆状病毒表达系统表达猪IFN-L3及其抗PEDV活性的研究. 郭珊珊,陈伟业,薛美,尹灵丹,罗毅,冯力,刘平黄. 2019

[10]口蹄疫病毒反向遗传操作和病毒空衣壳组装. 刘在新,李平花,曹轶梅,卢曾军,白兴文,孙普,郭建宏,刘湘涛,殷宏. 2008

[11]杆状病毒表达系统研究进展及在寄生虫基因工程疫苗中的应用前景. 景志忠,王佩雅,才学鹏. 2001

[12]几种植物源活性物质对昆虫细胞的毒力测定. 蒋红云,张兰,沈斌斌. 2013

[13]重组杆状病毒感染悬浮昆虫细胞及重组蛋白表达策略的优化. 李文丽,刘霞,刘在新,卢曾军,范朋举. 2018

[14]核蛋白NP对H5N1亚型禽流感病毒样颗粒疫苗免疫效果的影响. 薛春宜,陈娴娴,马军,陈峰,田国斌,毕英佐,陈化兰,曹永长. 2010

[15]犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因在昆虫细胞中的表达及其抗原性分析. 毕振威,王永山,范红结. 2011

[16]犬副流感病毒HN基因在昆虫细胞中的表达. 宋彩玲,齐宾宾,吕让,陈小微,刘明. 2014

[17]昆虫细胞表达免出血症VP60蛋白间接ELISA方法建立及评价. 刘怀然,曲连东,刘家森,单安山. 2010

[18]N9亚型禽流感病毒NA蛋白在昆虫细胞中的表达与鉴定. 衡武昌,崔鹏飞,张元成,邢鑫,谷文丽,颜成,孔兴天,王丛丛,彭大新,邓国华,陈化兰. 2022

[19]几种表达系统的比较. 吴丹,仇华吉,童光志. 2002

[20]兔出血症病毒VP60基因在昆虫细胞中形成病毒样颗粒及其特性. 刘怀然,刘家森,胡迎东,陈洪岩,单安山,曲连东. 2007

作者其他论文 更多>>

微信小程序