表达绵羊肺腺瘤病毒跨膜蛋白HepG2细胞系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘霄卉

作者： 刘霄卉;罗军荣;斯日古楞;周建华;马学恩

作者机构：

关键词： 绵羊肺腺瘤反转录病毒;跨膜蛋白;真核表达;HepG2细胞系

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2011 年 33 卷 04 期

页码： 323-326

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为深入研究绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)与绵羊肺腺瘤病(OPA)发病关系,本研究采用PCR方法从pGEX-4T-1-TM重组质粒中扩增编码JSRV跨膜蛋白(TM)的基因序列,并引入标签多肽HA序列和限制性内切酶位点,将其重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了重组质粒pcDNA-TM-HA。通过转染HepG2细胞并用G418筛选,对稳定表达TM的阳性细胞进行纯化,获得了稳定表达JSRV tm基因的HepG2细胞系。间接免疫荧光及western blot检测结果表明,重组蛋白TM-HA在HepG2细胞中得到正确表达。JSRV TM蛋白稳定表达细胞系的建立为进一步研究该蛋白与JSRV诱导OPA发病关系提供了重要的实验平台。

分类号： S852.65

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