HCV NS5B蛋白表达、纯化及活性测定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张秀杰

作者： 张秀杰;李莉;欧阳红生

作者机构：

关键词： HCV;NS5B蛋白;表达;纯化;活性测定

期刊名称： 吉林农业大学学报

ISSN： 1000-5684

年卷期： 2008 年 30 卷 02 期

页码： 154-156

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以HCV cDNA为模板,设计特异性扩增引物,PCR得到编码NS5B的基因,与PET-21a质粒连接,构建重组质粒。重组质粒转化入大肠杆菌Rosetta菌株,加入IPTG(终浓度0.5 mmol/L),30℃、5 h诱导表达。连续通过Ni-NTA柱、SP阳离子交换柱纯化蛋白,1 L菌液可得到1.2 mg蛋白。体外活性测定结果表明,所得蛋白具有RdRp功能,酶对底物UTP的Km值为2.06μmol/L。

分类号： R346

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