猪繁殖与呼吸综合征病毒5’非翻译区序列的反向遗传操作

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高飞

作者： 高飞;姚火春;孙志;王金勇;袁世山

作者机构：

关键词： 反向遗传操作;病毒基因组;非翻译区;感染性克隆;传代细胞;体外转录;猪无名高热;序列同源性;细胞病变;非编码区

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年卷期： 2007 年

页码： 5

收录情况： CSCD

摘要： 在猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北美株感染性克隆pCBC2的基础上,利用突变PCR技术成功构建了在病毒基因组5端非编码区(5UTR)和ORF1起始密码子之间插入NdeⅠ的全长克隆pTLNd4,并在此基础上将北美株病毒的5UTR替换为欧洲株的5UTR,成功构建了全长克隆pTLV8。以体外转录的RNA转染MARC-145细胞,pTLNd4产生了细胞病变(CPE),pTLV8未产生。对这两株突变病毒进行RT-PCR和NorthernBlot试验,分别对病毒基因组RNA复制和亚基因组mRNA转录水平进行分析;同时,还对产生CPE的pTLNd4进行了病毒学试验,结果表明它与亲本病毒无论从分子生物...

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