裂谷热病毒截断的Gn蛋白在E.coli中的表达与多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李月涛

作者： 李月涛;杨松涛;夏咸柱

作者机构：

关键词： 裂谷热病毒;病毒痒颗粒;多克隆抗体;大肠杆菌

期刊名称： 河南科技学院学报(自然科学版)

ISSN： 2096-9473

年卷期： 2024 年 52 卷 006 期

页码： 29-37

摘要： 目的 为避免作为中和试验病原的裂谷热病毒（RVFV）存在生物安全隐患,探索建立RVFV假病毒中和试验方法.方法 利用p ET-30a原核表达载体,构建重组质粒含有截短的Gn蛋白片段,转化BL21(DE3)感受态细胞,诱导表达目的蛋白通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）,表达蛋白的正确与否通过SDS-PAGE和Western Blotting检测,纯化表达蛋白通过带his标签的镍柱.将RVFV Gn蛋白纯化后免疫小鼠,抗体效价通过ELISA检测,多克隆抗体对G蛋白的特异性通过Western Blotting检测.结果 成功获得表达目的蛋白,RVFV Gn蛋白纯化后诱导小鼠产生的Gn多克隆抗体水平较高,并且多克隆抗体对G蛋白的特异性较强.结论 利用PET30a载体构建了可表达RVFV截短的Gn蛋白的大肠杆菌（E.coli）BL21(DE3),并且制备的多抗对全长G蛋白的特异性较好,将蛋白纯化免疫Balb/c小鼠,经ELISA检测制备的多克隆抗体,抗体滴度较高.

分类号： S852.4

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