PCR-RFLP筛选DNA文库克隆Btcry基因的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈中义

作者： 吴限;张杰;宋福平;管宇;黄大昉

作者机构：

关键词： 苏云金芽孢杆菌;DNA文库;PCRRFLP;杀虫蛋白基因;基因克隆

期刊名称： 中国农业科学

ISSN：

年卷期： 2003 年 04 期

页码： 398-402

收录情况： CSCD

摘要： Bt菌株C002对水稻二化螟、甜菜夜蛾具有高毒力,PCRRFLP鉴定含有cry1Aa、cry2Ab、cry1Ca和未知杀虫蛋白基因cryX等,其中cry1Ca位于染色体DNA6～9kb的EcoRI片段。染色体和质粒DNA分别经EcoRI完全酶切和Sau3AI部分酶切、电泳回收6～9kb片段。E.coliBt穿梭载体pHT315分别与目的DNA连接、转化大肠杆菌感受态细胞后获得了相应的DNA文库。约50个转化子合为一个转化子池,采用PCRRFLP方法快速检测,分别从约2000质粒DNA文库转化子和400个染色体文库转化子中筛选获得了cry1Aa、cr...

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