致病性副溶血弧菌三重PCR检测方法的建立和评价

文献类型： 中文期刊

第一作者： 何再平

作者： 何再平;王权;陈永军;刘迎春;韩先干;王少辉;白雪瑞;刘永杰;蒋蔚

作者机构：

关键词： 副溶血弧菌;种特异性基因;溶血素基因;多重PCR;检测

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2015 年 23 卷 06 期

页码： 48-55

摘要： 根据副溶血弧菌种特异性基因(tox R)、耐热直接溶血素基因(tdh)和相对耐热直接溶血素基因(trh)为靶基因分别设计引物,进行PCR扩增及反应条件的优化,建立了检测含有溶血素毒力基因的致病性副溶血弧菌的多重PCR方法。3对引物能分别特异性地扩增出368、269、486 bp的目的片段。副溶血弧菌均能扩增出tox R基因,不含溶血素基因的菌株(tdh-/trh-)仅扩增出1条目的片段,而含不同溶血素基因的致病性副溶血弧菌则分别扩增出2条(tdh+/trh-或tdh-/trh+)和3条(tdh+/trh+)特异性条带。检测其他非副溶血弧菌的供试菌,则不出现任何扩增条带。人工模拟样品检测结果显示对致病性副溶血弧菌的最低检测浓度为103CFU/m L。结果表明该多重PCR检测方法具有较好的特异性和灵敏性,对检测致病性副溶血弧菌有重要意义。

分类号： S941.4

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