酵母双杂交系统筛选猪流行性腹泻病毒N蛋白互作的宿主蛋白

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王忠泽

作者: 王忠泽;秦翠丽;孔宁;左叶雯;王蒙;郑浩;童武;李丽薇;于海;李智丽;单同领;童光志

作者机构:

关键词: 猪流行性腹泻病毒;酵母双杂交;N蛋白;蛋白互作

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2017 年 11 期

页码: 916-921

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白与宿主细胞中的互作蛋白,本研究构建PEDV N蛋白基因的重组载体p GBKT7-N,以其作为诱饵质粒,采用酵母双杂交方法,从猪肺泡巨噬细胞(PAM)cDNA文库中筛选出与N蛋白相互作用的蛋白。结果表明,诱饵蛋白在酵母双杂交系统中不存在毒性和自激活作用,而且筛选出6种与N蛋白互作的蛋白,分别为FTH1、LGALS3、CORO1C、SNRPG、KRTAP5-3和ZNF598。其中半乳糖凝集素3(LGALS3)和小核糖蛋白G(SNRPG)通过回返试验和免疫共沉淀试验证实其与PEDV的N蛋白存在特异性相互作用。本研究为进一步研究PEDVN蛋白的功能及病毒的致病机制奠定了基础。

分类号: S852.651

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