棉属野生种旱地棉蛋白激酶基因GarCIPK8的克隆与功能分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 冯娟

作者： 冯娟;范昕琦;徐鹏;张香桂;沈新莲

作者机构：

关键词： 旱地棉;GarCIPK8;耐盐性;耐旱性;Gossypium aridum; GarC1PK8; Salt stress; Drought stress

期刊名称： 作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2013 年 39 卷 001 期

页码： 34-42

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： CIPK(calcineurinB—likecalciumsensorinteractingproteinkinase)是植物钙感受器钙调磷酸酶B类似蛋白特定靶向的一类丝氨酸,苏氨酸蛋白激酶。在前期的研究中,我们将棉属野生种D亚组旱地棉(Gossypiumaridum)盐胁迫前后RNA混合样品进行转录组测序,发现一C1PK相关基因存在较高的转录丰度。盐胁迫下荧光定量PCR分析表明该基因在根部表现诱导上调表达,推测该基因可能参与植物在高盐胁迫下的生理调控。利用电子克隆及RT-PCR方法从旱地棉中克隆了一个ORF全长为1350bp的蛋白激酶基因GarClPK8。序列分析表明该基因编码的蛋白含有449个氨基酸,分子量为51.12kD,理论等电点为8.13,其N端催化结构域包含一个丝氨酸/苏氨酸蛋向激酶域,C端具有植物CIPK蛋白家族特有的24个氨基酸组成的NAF保守结构域;与水稻OsClPK8蛋白的相似度为73.95%。为进一步验证其功能,利用组成型高效强启动子CaMV35S和拟南芥逆境胁迫启动子rd29A构建植物表达载体并转化烟草,经PCR和RT—PCR分子检测,证明GarCIPK8基因已经整合到烟草基因组中,并正常表达。T1代转基因植株耐盐性鉴定结果表明GarCIPK8基因对提高转基因植株的耐盐性有较明显的作用,PEG干旱模拟试验也证明GarCIPK8基因可增强植株的抗旱性。

分类号： S852.655

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