番茄煤污假尾孢叶斑病菌实时荧光定量PCR检测技术的建立及应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 康华军
作者: 康华军;柴阿丽;石延霞;谢学文;郭建光;李宝聚
作者机构:
关键词: 煤污假尾孢;Avr4;实时荧光定量PCR;检测
期刊名称: 植物保护学报
ISSN: 0577-7518
年卷期: 2019 年 06 期
页码: 1214-1221
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为快速、准确地对番茄煤污假尾孢Pseudocercospora fuligena进行检测与定量分析,基于其Avr4基因设计特异性引物JWB-9F/JWB-7R,建立实时荧光定量PCR检测技术,分析该检测技术的特异性和灵敏度,并利用采集自重庆市、河北省和广西壮族自治区的14份材料对该检测技术的应用效果进行验证。结果表明,引物JWB-9F/JWB-7R仅可从番茄煤污假尾孢基因组DNA中扩增出232 bp的目的片段,特异性良好;实时荧光定量PCR检测技术的灵敏度为67.09 copies/μL,是普通PCR检测技术的1 000倍。且该实时荧光定量PCR检测技术可以实现未显症样本中番茄煤污假尾孢的定量检测,检测限为6.02×10~2copies/μL,实际应用效果较好。表明所建立的实时荧光定量PCR检测技术可用于番茄煤污假尾孢叶斑病的早期诊断和预测预报。
分类号: S436.412.1
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