文献类型: 中文期刊
第一作者: 仇华吉
作者: 仇华吉;金吉东;田志军;周艳君;王云峰;童光志
作者机构:
关键词: 日本脑炎病毒;NS1;NS1';RT-PCR;基因表达
期刊名称: 中国农业科学
ISSN: 0578-1752
年卷期: 2004 年 37 卷 04 期
页码: 614-618
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 用RT-PCR扩增并克隆了日本脑炎病毒弱毒株SA14-14-2的NS1、NS1'、NS1-2A的 cDNA片段,分别将其亚克隆到原核表达载体pET-30b(+),构建了重组原核表达质粒pET30b-NS1、pET30b-NS1'、pET30b-NS1-2A,转化大肠杆菌BL-21(DE3),用IPTG诱导培养。结果表明,仅有pET30b-NS1质粒转化的菌株获得表达,而另外2种重组质粒转化的菌株均无表达。表达的融合蛋白分子量约为46kD,约占菌体总蛋白的30.8%,Western blotting分析表明表达产物具有抗原活性。动物试验证实,重组NS1免疫小鼠蛋白可以抵抗强毒的攻击。笔者研究证实NS2A或部分NS2A的存在对于NS1的表达具有不利影响。
分类号: S852.64
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