3型鲤疱疹病毒白介素10单克隆抗体制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈静

作者： 陈静;张艳维;刘琴;朱晓真;贾钊;王俊亚;高娃;贾智英;桂朗;邹钧

作者机构：

关键词： 鲤疱疹病毒3型;白介素10;单克隆抗体;Western blotting;免疫荧光分析

期刊名称： 上海海洋大学学报

ISSN： 1674-5566

年卷期： 2024 年 001 期

页码： 18-29

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 白介素（Interleukin,IL）10是脊椎动物Th2细胞（T helper 2 cell）和先天淋巴细胞（Innate lymphoid cell）分泌的一种多效应细胞因子。3型鲤疱疹病毒（Cyprinid herpesvirus 3, CyHV3）ORF134编码IL10样蛋白，本研究构建了ORF134原核表达质粒，在大肠杆菌DE3感受态细胞中表达CyHV3-IL10重组蛋白。SDSPAGE分析结果表明，重组CyHV3-IL10蛋白约为18 ku，主要以包涵体形式表达。将CyHV3-IL10包涵体进行变性和复性，经分子筛凝胶柱层析纯化获得了纯度较高的重组CyHV3-IL10蛋白，利用CyHV3-IL10重组蛋白免疫小鼠制备了单克隆抗体，通过酶联免疫吸附测定法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）筛选，获得了2株亲和力强的抗体，并利用激光共聚焦技术和Western blotting对抗体进行鉴定。结果表明，FITC标记的单克隆抗体能够特异性识别HEK293细胞中表达的CyHV3-IL10重组蛋白和感染CyHV3的镜鲤脾和鳃组织中表达的CyHV3-IL10蛋白。CyHV3-IL10单克隆抗体的制备为后续研究CyHV3-IL10蛋白功能和建立CyHV3诊断方法奠定基础，为CyHV3病毒检测试剂盒的研发提供新思路。

分类号： S941.41

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