细极链格孢菌peaT2基因在毕赤酵母中的表达及蛋白功能确定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘文平

作者： 曾洪梅;刘延锋;袁京京;邱德文

作者机构：

关键词： peaT2;蛋白激发子;细极链格孢菌;毕赤酵母表达系统

期刊名称： 微生物学报

ISSN：

年卷期： 2007 年 04 期

页码： 593-597

收录情况： CSTPCD

摘要： 从细极链格孢菌表达文库获得阳性克隆子,序列分析表明,克隆的DNA片段中含有完整的开放阅读框架,将该基因命名为peaT2(GenBank登录号为EF212880)。用PCR法扩增peaT2基因的编码序列并亚克隆到毕赤酵母表达系统的表达载体pPIC9K上,得到重组质粒pPIC9K/peaT2。重组质粒经SacⅠ线性化后用电穿孔法导入到毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中,采用MD、G418-YPD平板和PCR法筛选Mut+表型,获得了分泌表达的重组毕赤酵母。随机挑取一菌株作为表达菌,用甲醇诱导PeaT2蛋白表达。SDS-PAGE及Westernblot检测结果均表明PeaT2在...

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