文献类型： 中文期刊
第一作者： 王姿逸
作者： 王姿逸;郝荣增;茹毅;卢炳州;杨洋;赵陇和;李亚军;马坤;冷非凡;郑海学
作者机构：
关键词： 脯氨酰寡肽酶;口蹄疫病毒;病毒复制;乳仓鼠肾细胞
期刊名称： 生物工程学报
ISSN： 1000-3061
年卷期： 2025 年 41 卷 007 期
页码： 2658-2671
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为了探究脯氨酰寡肽酶(prolyl oligopeptidase,POP)在乳仓鼠肾细胞(baby hamster kidney-21 cells,BHK-21 cells)中对口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)复制的调控作用,本研究首先利用蛋白免疫印迹(Western blotting)和实时荧光定量(real-time fluorescence quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)方法分析 FMDV 感染 BHK-21 细胞后对 POP 表达的影响;其次,构建了 POP真核表达质粒,利用Western blotting、RT-qPCR和病毒滴度测定的方法,系统评估POP过表达对O型和A型这2种血清型FMDV复制的影响;然后,设计并合成针对POP基因的特异性小干扰 RNA(small interfering RNA,siRNA),利用 RT-qPCR 和 Western blotting 检测筛选有效siRNA序列,进而通过Western blotting、RT-qPCR和病毒滴度测定,评估内源性POP表达下调后对FMDV复制的影响.结果表明,FMDV/O感染BHK-21细胞后对POP的表达无显著影响;POP过表达能显著促进FMDV/O和FMDV/A在BHK-21细胞中复制,并且病毒复制水平与POP表达量呈剂量依赖性正相关;siRNA介导的内源性POP表达下调显著抑制了 FMDV/O的复制.本研究首次在BHK-21细胞中证实了宿主蛋白POP对FMDV复制的促进作用,为开发高效口蹄疫灭活疫苗候选细胞株提供了重要的理论依据和潜在的分子靶点.
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