单核细胞增生李斯特菌prfA基因重组菌的构建及其生物学特性研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 丁波

作者： 丁波;孟庆玲;乔军;陈创夫;才学鹏;张再超;杨丽红

作者机构：

关键词： 单核细胞增生李斯特菌;同源重组;减毒重组菌;prfA基因

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2012 年 34 卷 09 期

页码： 677-681

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备单核细胞增生李斯特菌(LM)减毒的prfA基因重组菌,本研究通过构建重组质粒pKSV7-ΔprfA-gfp,电转化至LM TA感受态细胞中,将绿色荧光蛋白基因gfp插入LM的prfA基因第25 bp～93 bp之间,在42℃和10μg/mL氯霉素的双重选择压力下,筛选LM重组菌(rLM-ΔprfA-gfp),并对其生物学特性进行鉴定。试验结果表明,重组菌与亲本菌相比具有相似的体外生长特性,溶血素基因(hly)mRNA的转录水平降低;对小鼠的毒力显著减弱,其LD50由105.53升高到109.79,对肝、脾、肾的损伤不明显;免疫保护力试验显示重组菌与LM TA灭活疫苗的保护率分别为90%和35%,表明rLM-ΔprfA-gfp比传统疫苗具有更高的保护力。本研究构建的rLM-ΔprfA-gfp具有良好的遗传稳定性,并且具有较好的免疫原性,为LM活疫苗载体和分子标记疫苗的研制奠定了基础。

分类号： S852.61

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