滇龙胆GrSLS1基因的克隆与原核表达
文献类型: 中文期刊
第一作者: 张晓东
作者: 张晓东;李彩霞;王连春;李涛;王元忠
作者机构:
关键词: 滇龙胆;GrSLS1基因;基因克隆;序列分析;原核表达
期刊名称: 西北植物学报
ISSN: 1000-4025
年卷期: 2014 年 34 卷 07 期
页码: 1311-1317
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 以滇龙胆转录组为基础,采用RT-PCR技术克隆了滇龙胆幼叶裂环番木鳖苷合酶基因,命名为GrSLS1(GenBank登录号KF941191)。序列分析结果显示,GrSLS1基因开放阅读框长1 560bp,编码519个氨基酸;GrSLS1蛋白相对分子量为59.33kD,pI为8.96。生物信息学分析结果表明,GrSLS1蛋白属于SLS家族成员,其N端含有一跨膜螺旋区域(10~32);二级结构分析结果表明,GrSLS1蛋白主要由α-螺旋和无规则卷曲组成;系统发育分析表明,GrSLS1与帽柱木MsSLS2蛋白亲缘关系最近。构建原核表达载体pGEX-4T-GrSLS1,对GrSLS1基因进行原核表达,SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。该研究为进一步研究GrSLS1基因功能及通过在龙胆中过表达该基因提高龙胆苦苷含量奠定基础。
分类号: Q943.2
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