人颗粒溶素的原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王晚霞

作者： 王晚霞;兰喜;徐向红;居军;柳纪省

作者机构：

关键词： 颗粒溶素;原核表达;蛋白印记

期刊名称： 兰州大学学报(医学版)

ISSN： 1000-2812

年卷期： 2009 年 04 期

页码： 41-44

摘要： 目的克隆人颗粒溶素基因并进行原核表达。方法体外培养外周血单个核细胞并抽提总RNA,RT-PCR扩增人颗粒溶素的基因片段,鉴定正确后构建原核表达质粒pET-GNLY9K和pET-GNLY15K,并将其转入大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE和Westernblotting鉴定融合蛋白的正确性。结果成功构建了原核表达载体pET-GNLY9K和pET-GNLY15K,经诱导在原核表达系统中高效表达了相应分子质量分别约为31和37 kD的融合蛋白。结论利用原核表达体系成功表达了不同相对分子质量的颗粒溶素融合蛋白。

分类号： R392

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