鸭NOD1荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 曹守林

作者: 曹守林;韩先干;王少辉;田明星;丁铲;王桂军;于圣青

作者机构:

关键词: 鸭;先天免疫受体;NOD1;荧光定量RT-PCR

期刊名称: 中国家禽

ISSN: 1004-6364

年卷期: 2014 年 36 卷 08 期

页码: 18-22

收录情况: 北大核心

摘要: 为了建立鸭先天免疫受体核苷酸寡域1(NOD1)的荧光定量RT-PCR检测方法,依据GenBank中鸡NOD1序列设计特异性引物,克隆获得鸭NOD1序列,设计鸭NOD1、凋亡相关碱性蛋白(ARBP)荧光定量RT-PCR特异性引物,以鸭脾脏mRNA反转录后的cDNA为模板,通过构建质粒阳性标准品,建立检测鸭先天免疫受体NOD1转录水平的荧光定量RT-PCR方法。结果显示,建立的荧光定量RT-PCR方法对NOD1 mRNA的最低检测量为102拷贝,在1012~102拷贝范围内线性关系很好,R2≥0.999。该方法具有良好的特异性和重复性。应用于感染鸭疫里默氏杆菌Yb2株樱桃谷鸭脾脏中NOD1转录水平的检测,表明该方法可用于临床检测且适用性良好。

分类号: S834

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