nptⅡ::mgfp5融合基因的构建及其在柑桔遗传转化中的应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘小丰

作者： 刘小丰;彭爱红;许兰珍;邹修平;朱世平;赵晓春;陈善春

作者机构：

关键词： nptⅡ::mgfp5融合基因;柑橘遗传转化;GFP荧光;转化效率

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2013 年 34 卷 07 期

页码： 1282-1287

收录情况： CSCD

摘要： 早期、无损伤、易于操作的阳性芽检测技术,对提高柑橘遗传转化效率是十分有利的。本文设计和构建了nptⅡ::mgfp5融合基因,通过锦橙上胚轴转化体系研究其在柑橘遗传转化中的作用。nptⅡ::mgfp5融合基因全长1 578 bp,编码525个氨基酸,作为表达载体p1301NG的选择标记和报告基因。通过农杆菌介导法转化锦橙上胚轴,再生培养1周后用体式荧光显微镜观察外植体的再生情况。在再生培养第9天时即观察到GFP荧光再生芽的形成,再生培养后10~15 d是GFP再生芽形成的高峰期。GUS染色和PCR分子检测结果证明,GFP荧光检测结果是真实可靠的。研究结果表明:nptⅡ::mgfp5融合基因能够在再生培养早期筛选到阳性转化芽,有助于提高阳性转化芽的存活率,提高柑橘遗传转化效率。

分类号： S666

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