转Cry1Ac青花菜回交后代鉴定方法研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李占省

作者： 李占省;张黎黎;张小丽;舒金帅;苏彦宾;孙继峰;刘玉梅;方智远;杨丽梅;庄木;张扬勇;吕红豪

作者机构：

关键词： 青花菜;转基因;Cry1Ac;小菜蛾;遗传

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2018 年 01 期

页码： 97-108

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 转Bt基因青花菜在遗传分离后代中的鉴定方法,对于准确筛选阳性单株和抗虫材料具有重要影响。利用5份青花菜材料、1份阳性对照(转Cry1Ac基因纯合材料)和5份回交父本(阴性对照)为试验对象,在基因水平上对Cry1Ac进行普通PCR扩增,蛋白水平上采用Bt-Cry1Ab/1Ac转基因检测试纸条测定,表观上采用小菜蛾离体饲虫试验进行抗性鉴定,比较阐明了3种方法的鉴定效果和优缺点。结果表明,3种方法分别从5份青花菜回交材料的159个分离单株中检测到82、77和75份阳性株,经卡方显著性检验,各材料阳性单株与非阳性单株分离后代均符合孟德尔遗传规律。分析表明,小菜蛾离体饲虫试验对于鉴定转Cry1Ac后代抗虫效果准确可靠,但需要很好地控制实验条件;Bt-Cry1Ab/1Ac转基因检测试纸条灵敏度高,可快速观察到Bt毒蛋白的实际表达量,基本不受条件限制,但必须控制人为误差;普通PCR扩增能够鉴定阳性株,但不能反映实际抗虫效果,必须结合小菜蛾饲虫试验或Bt毒蛋白水平上的检测才能实现精准鉴定。

分类号： S635.3

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