小麦叶片cDNA-AFLP扩增反应体系的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李剑峰

作者： 李剑峰;张跃强;樊哲儒;王岩军;王浩;曲延英;范玲

作者机构：

关键词： 小麦叶片;cDNA-AFLP;预扩增;选择性扩增;体系优化

期刊名称： 新疆农业科学

ISSN： 1001-4330

年卷期： 2010 年 47 卷 03 期

页码： 489-494

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】建立并优化小麦叶片cDNA-AFLP扩增反应体系,进行cDNA-AFLP分析,挖掘新春6号相关抗旱基因。【方法】在盆栽小麦苗期水分胁迫下叶片cDNA-AFLP的试验中,分别对20μL预扩增和选择性扩增反应体系中的4种反应条件影响因子进行不同梯度优化的研究,包括引物、dNTP、Mg2+及TaqDNA聚合酶的用量。【结果】PCR预扩增20μL反应体系中,引物(40 mM)1.0μLd、NTP(2.5 mM)1.8μL、Mg2+(25 mM)2.2μL、TaqDNA聚合酶(5U)0.5μL时预扩增效果较好;PCR选择性扩增20μL反应体系中,引物(40 mM)0.6μL、dNTP(2.5 mM)2.0μL、Mg2+(25 mM)1.6μL、TaqDNA聚合酶(5U)0.4μL时,可得到更多清晰可辨的TDFs(transcriptderived fragments)。【结论】试验通过对引物、dNTP、Mg2+、TapDNA聚合酶用量等因子进行筛选,获得较为理想的预扩增和选择性扩增体系,得到了更多有效的条带,为利用cDNA-AFLP研究小麦抗旱相关基因的分离及其克隆奠定了良好的基础。

分类号： S512.1

  • 相关文献

[1]苜蓿cDNA-AFLP反应体系的建立和优化. 蔡丽艳,石凤翎,李志勇,高翠萍,高飞翔. 2011

[2]自主研究发明的成像光谱仪近地应用及建模初探. 马智宏,王北洪,朱大洲,黄文江. 2010

[3]小麦春季喷施硼肥促高产. 吴玉光. 2011

[4]小麦叶片胁迫状态下的高光谱图像特征分析研究. 张东彦,张竞成,朱大洲,王纪华,罗菊花,赵晋陵,黄文江. 2011

[5]数学形态学在作物病害图像预处理中的应用研究. 刘立波,赵春江,吴华瑞,高荣华. 2013

[6]小麦叶片蛋白质组的2D-LC分离及NanoLC-MS/MS分析. 潘映红,徐琴,罗继,徐世昌,赵奎军. 2009

[7]用光谱反射率诊断小麦水分状况的可行性分析. 田庆久,宫鹏,赵春江,郭晓维. 2000

[8]适用于小麦叶片蛋白质组分析的样品制备方法. 刘伟霞,潘映红. 2007

[9]小麦叶片中1种降解Rubisco大亚基的蛋白酶鉴定. 吴蔚,陈晓,张鹏,郑斯旻,吴文,郭金贺,徐朗莱,芮琪. 2015

[10]小麦叶片胞间液蛋白质组初步分析. 孟庆石,徐世昌,潘映红. 2010

[11]一种简易高效的小麦叶片胞间液蛋白提取方法的建立. 张朝,严伟,徐世昌,潘映红. 2011

[12]基于NURBS曲面的小麦叶片三维可视化研究与实现. 李书钦,诸叶平,刘海龙,李世娟,刘丹. 2016

[13]小麦叶片蛋白质组的2D-LC分离及Nano LC-MS/MS分析. 潘映红,徐琴,罗继,徐世昌. 2009

[14]小麦锈菌冬孢子萌发及其功能研究进展. 陈万权,刘博,刘太国,高利. 2011

[15]不同耕作方式和施肥水平对小麦叶片光合特性的影响. 聂胜委,张巧萍,许纪东,王建超,张浩光,陈朝霞. 2023

[16]玉米双低频酶cDNA-AFLP体系的建立. 宋欣,杨文鹏,赵德刚. 2008

[17]cDNA-AFLP和cDNA-SRAP技术在植物基因差异表达上的应用及其分析比较. 李杨瑞,杨柳,王爱勤,杨丽涛,熊发前,甘崇昆. 2009

[18]向日葵盐胁迫相关基因的cDNA-AFLP差异表达. 孙瑞芬,张艳芳,郭树春,于海峰,李素萍,乔慧蕾,聂惠,安玉麟. 2015

[19]桃花芽休眠解除相关上调表达基因的cDNA-AFLP分析. 罗静,张巧莲,武峥,漆巨容,谢永红. 2012

[20]花椰菜(Brassica oleracea var.botrytis)抗黑腐病差异表达cDNA片段的克隆及功能的初步研究. 古瑜,毛英伟,赵前程,孙德岭,刘惠静,宋文芹. 2008

作者其他论文 更多>>

微信小程序